L’equip de recerca de Silenciament i Edició Gènica dirigit per la Dra. Verònica Noé i el Dr. Carlos Ciudad de la secció de Bioquímica i Biologia Molecular de la Facultat de Farmàcia i Ciències de la Alimentació ha publicat un article en la revista Molecular Therapy-Nucleic Acids (Cell Press) sobre la utilització de PolyPurine Reverse Hoogsteen (PPRH) reparadors per la correcció de mutacions puntuals en el locus endogen de cèl·lules de mamífer sense provocar efectes off-target en el genoma.

En aquest estudi, es descriu la correcció de mutacions puntuals en cèl·lules de mamífers mitjançant PPRHs-reparadors. Aquestes molècules consisteixen en una pinça de polipurines lligada a una seqüència d'extensió homòloga a la seqüència de DNA que  es vol reparar. La pinça s’uneix a una seqüència diana de polipirimidines en el DNA de doble cadena, tot produint una estructura tríplex, i la seqüència d'extensió contenint el nucleòtid corregit es recombina amb la seqüència del locus endogen del gen a reparar.

S’han reparat diferents mutacions puntuals del gen adenosil fosforribosil transferasa (aprt), defecte que en humans produeix la litiasi per dihidroxiadenina. Les cèl·lules reparades es van analitzar mitjançant seqüenciació de DNA, expressió de mRNA i activitat enzimàtica per confirmar la correcció de la mutació. A més, es va seqüenciar el genoma complet de les cèl·lules reparades i no s’ha detectat cap efecte off-target generat pel PPRH-reparador. També es van realitzar assajos de retardació en la mobilitat electroforètica per demostrar la unió del PPRH-reparador a la seva seqüència diana i la formació d’una estructura de bucle que estimula la recombinació homòloga.